Vision色譜柱填充方法一般有4種:
①高壓勻漿法,多用于分析柱和小規(guī)模制備柱的填充;
②徑向加壓法,Vision色譜柱;
?、圯S向加壓法,主要用于裝填大直徑柱;
④干法。柱填充的技術(shù)性很強,大多數(shù)實驗室使用已填充好的商品柱。
必須指出,液相色譜柱的獲得,裝填技術(shù)是重要環(huán)節(jié),但根本問題還在于填料本身性能的優(yōu)劣,以及配套的色譜儀系統(tǒng)的的結(jié)構(gòu)是否合理。
無論是自己裝填的還是購買的Vision色譜柱,使用前都要對其性能進(jìn)行考察,使用期間或放置一段時間后也要重新檢查。柱性能指標(biāo)包括在一定實驗條件下(樣品、流動相、流速、溫度)下的柱壓、理論塔板高度和塔板數(shù)、對稱因子、容量因子和選擇性因子的重復(fù)性,或分離度。一般說來容量因子和選擇性因子的重復(fù)性在±5%或±10%以內(nèi)。進(jìn)行柱效比較時,還要注意柱外效應(yīng)是否有變化。
一份合格的Vision色譜柱評價報告應(yīng)給出柱的基本參數(shù),如柱長、內(nèi)徑、填料的種類、粒度、色譜柱的柱效、不對稱度和柱壓降等。
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