層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體,我們研究所用的就是同興玻璃儀器,一般用玻璃管或有機(jī)玻璃管。根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動(dòng)相中分配系數(shù)不同,從而分離的一種層析法。
層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體,一般用玻璃管或有機(jī)玻璃管。層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時(shí)應(yīng)將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。此外, 直徑加大,洗脫液體體積增大,樣品稀釋度大。
玻璃層析柱,開口大,加料快,不需要其他儀器的配合,上方可以做成標(biāo)準(zhǔn)口與其他的標(biāo)口玻璃儀器相接,但有不容易測(cè)量,篩網(wǎng)下方容易殘留很多液體,層析速度較慢,不準(zhǔn)確的特點(diǎn),一般用于對(duì)精度要求沒有那么高的實(shí)驗(yàn)。
加壓層析柱,兩端一般使用4F材料,耐腐蝕,酸堿性的耐度也可以,中段有玻璃材料的,也有有機(jī)玻璃材料的,需要與蠕動(dòng)泵相結(jié)合,加快層析速度,用泵將料打進(jìn),如果沒有泵則使用比較麻煩。
那普通玻璃層析柱與中壓玻璃層析柱的區(qū)別有哪些呢?下面一起來看看吧。
1.中壓玻璃層析柱耐壓范圍3-6bar,而普通玻璃層析柱耐壓范圍1-2bar,兩者的材質(zhì)及厚度均不一樣
2.中壓玻璃層析柱帶轉(zhuǎn)換接頭(軸向伸縮功能),能給柱內(nèi)增壓和調(diào)節(jié)填料層高度,而普通型無此功能,這是兩者主要的區(qū)別
3、中壓玻璃層析柱的液體分布系統(tǒng)比普通型更加優(yōu)化、更加復(fù)雜、液體分布效果更為均勻,進(jìn)液不會(huì)沖擊填料層
4、普通玻璃層析柱的直徑大到10cm,而中壓玻璃層析柱的直徑能到20cm、25cm、30cm,一般在蛋白純化、天然產(chǎn)物有效成分提取、核酸質(zhì)粒提取、大分子分離等一類填料非常昂貴的實(shí)驗(yàn),建議使用中壓玻璃層析柱,因?yàn)橹袎翰A游鲋b柱方便、分離效果理想,實(shí)驗(yàn)?zāi)芤淮纬晒Φ膸茁蚀蠛芏?br />
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